De: Roberto Patarca y Mary Ann Fletcher
Departamentos de Medicina, y Microbiología e Inmunología, Escuela de Medicina
de la Universidad de Miami, Laboratorio E.M. Papper de Inmunología Clínica,
P.O. Box 016960 (R-42), Miami, FL 33101
RESUMEN
El bromuro de laurildimetilbenzilamonio es una sal de Bensalconio o alquilamina biocida que interfiere con la transducción de señales en una variedad de tipos y procesos celulares a través de su actividad sobre membranas biológicas y su acción sobre proteínas que interactúan con el nucleótido de guanina trifosfato (proteínas G).
En el presente trabajo se exploraron los efectos del bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) sobre el sistema inmune y su relevancia al ciclo de vida del virus de inmunodeficiencia adquirida.
Se encontró que este biocida inhibe de manera dosis - dependiente la actividad proliferativa estimulada por mitogenos de linfocitos T y B.
A pesar de que no afecta la expresión de marcadores de superficie en células inmunes en reposo o en proliferación, el bromuro de laurildimetilbenzilamonio afecta diferencialmente la expresión de genes de citoquinas, probablemente como reflejo de una dependencia variable de la expresión de estas ultimas sobre procesos mediados por proteínas G.
Además, el bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) no afecta la actividad citotoxica de células asesinas naturales intactas contra células K562, una actividad que ha sido reportada como insensible a anticuerpos anti-GS.
Las observaciones presentadas en este trabajo junto con reportes previos de actividad viricida y espermicida directa favorecen el uso de las sales Bensalconio en preparaciones clínicas de uso tópico para la prevención de infecciones venéreas vírales como, por ejemplo, aquellas usadas en condones.
ENGLISH:
Lauryldimethylbenzylammonium bromide is a benzalkonium salt or alkylamine biocide that affects signal transduction in a variety of cell types and processes through its cell-surface membrane activity and its interaction with guanine nucleotide triphosphate-binding proteins (G proteins).
The present report explores the effects of lauryldimethylbenzylammonium bromide (K-ODONTO PLUS) on the immune system and their relevance to the life cycle of the human immunodeficiency virus.
The latter biocide was found to downregulate in a dose-dependent manner mitogen-stimulated T- and B-lymphocyte proliferative activity.
Although it does not affect unstimulated or stimulated immune cell-surface marker expression, lauryldimethylbenzylammonium bromide (K-ODONTO PLUS) differentially affects cytokine gene expression, probably as a reflection of variable cytokine gene expression dependence on G-protein-mediated pathways.
Moreover, lauryldimethylbenzylammonium bromide does not affect cytotoxic activity of intact natural killer cells against K562 cell targets, an activity that has been reported to be insensitive to anti-GS antibodies.
The observations presented herein along with previous reports of direct viricidal and spermicidal activities favor the use of benzalkonium salts in topical clinical preparations for the prevention of viral venereal infections as, for instance, those used in condoms.
Key words: human immunodeficiency virus, biocide, G-proteins, cytokines, NK cells.
INTRODUCCION
Las sales de Bensalconio son Amonios cuaternarios usados comúnmente como desinfectantes en soluciones de uso clínico o comercial y, en concentraciones de 0.05% y superiores, ejercen un efecto inhibitorio directo sobre la actividad de transcriptasa inversa del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) e inactivan a este virus en secreciones seminales y genitales (1).
La exposición de VIH al cloruro de Bensalconio en concentraciones superiores al 0.05% destruye la infestividad viral de células blanco susceptibles (1).
Además de los efectos viricida directos mencionados, las sales de Bensalconio pueden afectar el ciclo de vida de VIH en otros puntos ya que afectan la función de proteínas heterotriméricas regulatorias que interactúan con el nucleótido guanina (proteínas G).
En tal sentido, una molécula de superficie acoplada a proteína G denominada "fusina", la cual comparte 37% de identidad a nivel de aminoácido con el receptor de interleucina 8, ha sido identificada como cofactor para la entrada a la célula de cepas linfotrópicas de VIH (2), y un receptor de quimoquina funciona como el cofactor de entrada a los macrófagos de cepas monotrópicas primarias de VIH (3,4).
Estas observaciones abren la posibilidad de que sustancias como las sales Bensalconio que interactúan con proteínas G inhiban la entrada del VIH a las células.
El requerimiento de VIH de la activación o proliferación de la célula huésped para su replicación provee otro posible punto de inhibición de las sales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) en el ciclo de vida de este virus.
En tal sentido, existe amplia evidencia sobre la participación de las proteínas G en el crecimiento y diferenciación de varios tipos celulares (5-7), y las sales de Bensalconio tienen un efecto antiproliferativo sobre células de linfoma múrido (8), fibroblastos humanos (9), fibroblastos de cápsula de Tenón humanos (10,11), células V79 (12), células de red trabecular humana (13), y queratinocitos humanos y de rata (9, 14-16).
En el presente trabajo demostramos que el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) inhibe la proliferación de linfocitos humanos y afecta diferencialmente la expresión de citoquinas, tales como el factor de necrosis tumoral, por células inmunes sin afectar la expresión de marcadores de superficie en dichas células o la actividad citotoxica de células asesinas naturales.
MATERIALES Y METODOS
La actividad proliferativa de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) en respuesta a la fitohemaglutinina, un mitógeno dependiente de célula T, y al mitógeno de fitolaca, el cual es dependiente de célula B, fue medida en ensayos de sangre completa a través de la incorporación de timidina tritiada tal como se ha descrito anteriormente (17).
Brevemente, se disolvió, en proporción de 1:5, sangre heparinizada en medio RPMI 1640 contentivo de suero de becerro fetal al 10% e inactivado con calor, HEPES, L-glutamina (1 mM), 100 unidades de pencicilina y 50 mg de streptomicina.
Esta mezcla fue dispensada por triplicado en platos de microdilución (Costar, Cambridge, MA) y se añadieron el mitógeno y la sal de bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) para un volumen final de 200 ml/pozo. Los platos fueron incubados por 3 días (o por dos días para los replicados usados en las determinaciones de niveles de citoquinas) a 37 grados Celsius en una atmósfera humidificada de 5% de CO2.
Seis horas antes de completar el período de incubación, los cultivos fueron pulsados con 25 ml de timidina tritiada (1 mCi/pozo; Dupont, NEN Research Products, Boston, MA).
Al final del período de incubación, los cultivos fueron colectados en discos de papel de filtro de vidrio y contados en un contador de centelleo beta (LKB Instruments, Inc., Rockville, MD).
Las células de los experimentos de proliferación descritos anteriormente fueron incubadas con anticuerpos monoclonales específicos para distintos marcadores de superficie celular y analizadas por citometría de flujo basada en anticuerpos fluorescentes de dos colores usando el instrumento Coulter Elite tal como se ha descrito anteriormente (18).
Las concentraciones de citoquinas en los fluídos sobrenadantes de los cultivos de PBMC descritos anteriormente fueron determinadas usando inmunoensayos de fase sólida comerciales (R&D Systems, Minneapolis, MN) tal como se ha descrito en detalle anteriormente (19).
La actividad citotóxica de células asesinas naturales fue determinada usando el ensayo de liberación de 51Cr tal como se ha descrito anteriormente (20).
La línea celular K562, una línea eritroleucémica sensible a actividad NK, fue usada como blanco. Los ensayos fueron realizados en triplicado usando cuatro proporciones de células blanco a efector con una incubación de cuatro horas.
La liberación total fue determinada a través de la lisis de las células con Tritón X y los resultados fueron expresados en la gráfica como proporciones de liberación experimental en relación a liberación total despues de la sustracción de liberación espontánea.
RESULTADOS Y DISCUSION
Los experimentos resumidos en la Figura 1 muestran que el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) inhibe de manera dosis-dependiente la proliferación en ensayos de sangre completa de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) en respuesta a la fitohemaglutinina (PHA), un mitógeno dependiente de células T, y al mitógeno de la fitolaca (PWM) el cual es dependiente de células B.
Las concentraciones de inhibición media (IC50) de la sal fueron de 0.025% en los ensayos de proliferación con PHA y con PWM. A pesar del efecto antiproliferativo del bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS), no se observaron cambios en las proporciones de células sin estimular ó estimuladas con mitógeno expresando distintos marcadores de superficie celular (CD2, CD3, CD4, CD5, CD8, CD11a, CD19, CD20, CD29, CD45RA), incluyendo marcadores de activación (CD26, HLA-DR) (Figura 2).
La falta de efecto del bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) sobre las proporciones de células linfoides fue confirmada a través de la incubación de sangre periférica por 4 horas con diferentes concentraciones de la sal (Figura 3). En tal sentido, las proporciones de células T expresando el complejo asociado a receptor de célula T, CD3; CD2; el pan-marcador de célula T, CD5; el marcador de activación CD26 (CD3+CD26+, CD2+CD26+); los subconjuntos de células T CD4+ (CD4+CD45RA+ y CD4+CD29+); los subconjuntos de células T CD8+ (CD8+CD11a+ y CD8+HLA-DR+); y de células B (CD19+ y CD20+) permanecieron inalteradas aún a concentraciones de bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) que causan inhibición total de la actividad antiproliferativa.
Estas observaciones sugieren que el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) no afecta en forma detrimental la viabilidad de subpoblaciones particulares de células linfoides y que las proporciones relativas de estas células se mantienen a pesar de la inhibición de la actividad proliferativa.
Sin embargo, es posible que la expresión de marcadores de activación estudiados es proximal al estadío del ciclo celular afectado por el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS), y que la proporción de otros marcadores de activación sea afectada.
La inhibición de la actividad linfoproliferativa por parte del bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS), posiblemente a través de procesos mediados por proteínas G, puesta en evidencia en este estudio es consona con la observación previa de que una proteína G sensible a la toxina del cólera regula la proliferación de células T (21).
Además, un mecanismo mediado por un receptor acoplado a una proteína G sensible a la toxina de la tos ferina es responsable de la inhibición por parte de compuestos canabinoides (marijuana y delta-9-tetrahidrocanabinol) de las respuestas de proliferación linfocitaria a PMA más ionomicina y de las respuestas celulares de formación de anticuerpos IgM dirigidas contra eritrocitos de oveja (22,23).
La hiporeactividad a largo plazo de células T después de estimulación a través del receptor de antígeno puede también ser consecuencia de la transducción de señales acoplada a proteína G (24).
En tal respecto, la perturbación del complejo de receptor de antígeno de linfocito T/CD3 ó la estimulación por forbol éster de células T Jurkat conlleva a la activación de fosfolipasa D, probablemente secundaria a la activación de proteína quinasa C (25) ó a un mecanismo mediado por proteína G.
En apoyo a esta última propuesta, cabe resaltar que una proteína G de 68-kDa, la cual es insensible a las toxinas del cólera o de la tos ferina, ha sido asociada específicamente con el complejo receptor de célula T/CD3 (26). Otra evidencia de la participación de la señalización por proteína G en la activación de célula T viene de estudios del H12.3, un gen que pertenece a la familia de subunidades b de proteínas G, la expresión del cual es inducida en la fase tardía de estimulación mitogénica de células T y B (27).
En cuanto a la expresión de genes de citoquina, el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) inhibe la liberación de factor de necrosis tumoral (TNF)-a por parte de células mononucleares de sangre periférica estimuladas con mitógeno (Figura 4).
Esta última observación es consistente con el hecho de que una proteína G sensible a la toxina del cólera, junto con una proteína quinasa dependiente de calmodulina y una proteína tirosina quinasa, está involucrada en la liberación de TNF-a por parte de monocitos humanos tras inducción por peptidoglicano y por lipopolisacárido de Staphylococcus epidermidis (28).
También se ha demostrado que la liberación de TNF-a es inhibida por la pentoxifilina [Trental; 3,7-dimethyl-1-(5-oxohexyl) xantina], la cloroquina, y el antioxidante apocinina (28).
Debido a que la unión del VIH-1 al receptor CD4 induce la expresión, por parte de PBMCs, de TNF, el cual, a su vez, potencia la replicación viral (29,30), estimula la actividad linfoproliferativa de células T (31), y disminuye la eficacia terapéutica de la zidovudina (azidotimidina, AZT), la inhibición de la liberación de TNF por parte de las sales de benzalconio puede contribuir a la inhibición de tanto la linfoproliferación como de la replicación del VIH.
En tal sentido, se ha demostrado que la pentoxifilina inhibe la liberación de TNF, tiene actividad contra la replicación del VIH, y es beneficiosa en pacientes con cáncer (18,32).
En contraste con su efecto potencial sobre la expresión de TNF-a, el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) induce la producción de interleucina-1b en PBMC estimulados con PHA pero no afecta la producción de IL-1b por PBMC en respuesta a PWM (Figura 4).
En tal sentido, cabe resaltar que se ha demostrado que el cloruro de Bensalconio induce la producción intracelular en queratinocitos humanos de IL-1a sin liberación concomitante al medio de cultivo (33).
A pesar de que las proteínas G también están involucradas en la transducción de señales asociadas a IL-1, dicha señalización puede incluir mecanismos distintos a los receptores acoplados a proteína G convencionales (34).
La migración de leucocitos neutrófilos a focos inflamatorios es importante para la eliminación de microorganismos.
La respuesta quimotáctica inicial es mediada por quimoatrayentes clásicos como el formil-Met-Leu-Fen o quimoquinas como IL-8 y RANTES las cuales se unen a receptores con siete porciones transmembrana y acoplados a proteína G (35-43).
IL-8 es producida en respuesta a estímulos inflamatorios tales como lipopolisacárido, IL-1 y TNF (40,44).
Consistente con su efecto inhibitorio sobre la expresión de TNF-a en PBMC estimulados con mitógeno y del efecto estimulatorio sobre la expresión de IL-1, la presencia del bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) durante la estimulación mitogénica de PBMCs tiene un efecto ligeramente inhibitorio sobre la producción de IL-8 (Figura 4) lo cual podría afectar consecuentemente la quimotaxis de leucocitos.
En tal sentido, se ha demostrado que el cloruro de Bensalconio, en concentraciones de 0.8 mg/l, es perjudicial a la quimotaxis de granulocitos humanos (45) y que, dependiendo de la concentración y el tiempo de incubación, tiene un efecto perjudicial sobre la polimerización de actina, la fagocitosis y los procesos oxidativos en neutrófilos humanos (46).
La inhibición de la función granulocítica no es absoluta ya que, en otro estudio, el cloruro de Bensalconio (0.1% peso/volumen) causó un incremento de cinco veces en la actividad de elastasa en leucocitos humanos expuestos a sustratos de 4-nitroanilida (47), y estudios en células de red trabecular bovina mostraron poco cambio en la organización de la vimentina y actina y en la condensación de fibras citoesqueléticas después de incubación con cloruro de Bensalconio (48).
Debido a que TNF-a e IL-8 tienen actividad angiogénica (44,49-51), la inhibición potencial de su producción mediada por las sales de benzalconio puede ser relevante a la prevención y/o tratamiento de procesos angiogénicos asociados a microbios, tales como el sarcoma de Kaposi, la bartonelosis o verruga peruana, y la angiomatosis bacilar (52-61).
Las sales de Bensalconio pueden afectar varias rutas relacionadas a la angiogénesis porque TNF-a induce la expresión de c-ets 1 (62) y B61 (63) en células endoteliales al igual que la liberación de mediadores secundarios, tales como las prostaglandinas (49) y el factor de activador de plaquetas (1-O-alkyl-2-acetil-sn-glicero-3-fosfocolina) (64,65).
En tal sentido, se cree que c-ets 1 regula la transcripción de genes que codifican proteasas degradadoras de matriz necasarias para angiogénesis (62), y B61 es un producto de gen de célula endotelial el cual es angiogénico y también puede funcionar como quimotaxina de célula endotelial a través de su interacción con la tirosina quinasa del receptor Eck de célula endotelial (63).
El factor angiogénico y quimotáctico IL-8 y las citoquinas IL-6, IL-3, y TNF-b también modulan, a través de la interacción con proteínas G, la formación de leucotrienos inducida por formil-Met-Leu-Fen en neutrófilos (66).
Por tanto, el efecto inhibitorio del bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) sobre la producción estimulada por PWM de IL-6 y de la producción estimulada por PHA de IL-3 por parte de PBMCs (Figura 4) puede también afectar la función neutrofílica.
Además, IL-3 estimula la supervivencia y proliferación de líneas celulares precursoras multipotenciales indirectamente a través de proteína(s) G sensible a la toxina de la tos ferina (67), y las células mastoideas dependientes de IL-3 portan una proteína G sensible a la toxina de la tos ferina acoplada al receptor de prostaglandina (68).
En relación a la expresión de citoquinas asociada a células T, el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) no altera la expresión de IL-4 o de HLA-DR por PBMC activados por PHA ó PWM.
Esta última observación es consistente con la observación de que IL-4 aparentemente induce la expresión de HLA-DR en monocitos normales humanos o en células blanco de leucemia M2 también a través de una ruta de señalización mediada por proteína G (69) la cual podría ser sensible a las sales de Bensalconio.
El bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) también inhibe la producción de IL-2 e IL-5 por PBMC activados por PHA.
La inhibición por el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) de la producción de IL-5 también es relevante a las respuestas inflamatorias locales pues IL-5 induce la diferenciación y proliferación de eosinófilos en médula ósea, activa eosinófilos y prolonga su supervivencia in vitro (70-77), y estimula la producción de quimoatrayentes de linfocitos por parte de eosinófilos humanos (78).
Las proteínas que interactúan con GTP juegan un papel importante en el control de la exocitosis. Por ejemplo, clones de linfocitos T citotóxicos CD8+ permeabilizados con la toxina a de Staphylococcus aureus pueden ser estimulados a liberar los contenidos de sus gránulos por exocitosis en respuesta al 5'-(gamma-tio)trifosfato (GTP gamma S) (79).
El uso de varios inhibidores que actúan en las fases tempranas de la activación de células T ha revelado que la proteína G que afecta a la exocitosis está localizada distalmente en la cascada de eventos que se desencadena la activación de células T (79).
Por ejemplo, el inhibidor de proteína quinasa C estaurosporina, y los inmunosupresores ciclosporina A y FK-506, y el inhibidor de tirosina quinasas genisteína, todos inhiben la liberación de esterasa activada en células intactas por anticuerpos anti-receptor de célula T, pero no la liberación inducida por GTP gamma S en células permeabilizadas.
La ciclosporina A, FK-506, y genisteína también bloquean la exocitosis inducida en células intactas por una combinación de forbol éster e ionóforo de calcio A23187. Además, la citocalasina B, un inhibidor de la polimerización de actina, inhibe la exocitosis en células intactas pero aumenta la exocitosis en células permeabilizadas.
Las células asesinas naturales (células NK) son una subpoblación de linfocitos que mata a células infestadas por virus y células tumorales sin sensitización previa (20).
La participación de una proteína G en la exocitosis granular en células NK es también demostrada a través de la permeabilización de dichas células e incubación con GTP gamma S e IL-2 ó IL-12 (80).
En tal sentido, la introducción de anticuerpos anti-proteína Gs dentro de células NK activadas por IL-2 y permeabilizadas con estreptolisina O (células IANK) inhibe el asesinato celular de células blanco RAJI NK-resistentes/IANK-sensibles pero no de células blanco K562 NK-sensibles (81).
Las células K562 y RAJI inducen la liberación de ao, ai, as o aq.11 de membranas de células IANK, lo cual sugiere que los receptores potenciales que reconocen las células blanco K562 ó RAJI están acoplados a Go en células IANK, pero sólo aquéllos que reconocen a las células RAJI están acoplados con Gs (81).
Tal como lo ilustra la Figura 6, en concentraciones de hasta 0.025%, el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) no afecta la actividad citotóxica de células NK intactas sobre células blanco K562, lo cual sugiere que la proteína G0 que puede estar acoplada al receptor K562 es insensible al bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS).
Habría que determinar si la proteínas Gs acopladas a los receptores de RAJI son sensibles a las sales de Bensalconio.
También de relevancia a la actividad anti-VIH es la demostración de que el cloruro de Bensalconio induce un estado de activación metabólica en una alta proporción de células de Langerhans epidérmicas CD1+ (82) en el contexto de aposición significativa de linfocito/célula de Langerhans.
En este sentido es diferente a otros irritantes como el sulfato de laurilo sódico, el ditranol, el ácido nonanoico, el aceite de crotón, y el propilenglicol.
La activación de células CD1+ inducida por sales de benzalconio es relevante a la inmunidad micobacteriana porque las células CD4-CD8- con un receptor de célula T a/b y específicas para CD1 (una familia de glicoproteínas asociadas a la b2-microglobulina, nopolimórficas, no codificada por MHC) reconocen antígenos nopeptídicos bacterianos tales como el ácido micólico (una familia de ácidos grasos de cadena larga ), lipoarabinomanam (LAM), y TUBag4 (un compuesto que contiene timidina trifosforilada en 5') (83-86).
Además, se ha demostrado que las células T a/b CD4-CD8- expresan niveles altos de Eta-1/osteopontina, una citoquina asociada con resistencia natural a Rickettsia tsutsugamushi, flavivirus, y posiblemente Bartonella bacilliformis (53, 87-91).
Queda por determinar si las sales de benzalconio pueden estimular las células CD1+ y la producción de Eta-1/osteopontina.
En cuanto a la utilidad practica de estudios de sales de Bensalconio sobre el sistema inmune y el ciclo de vida del VIH, se ha demostrado que el cloruro de Bensalconio y el nonoxydol-9 son espermicidas benignos (no inducen cambios citológicos en el epitelio cervico-vaginal) y eficientes cuando se usan correctamente durante el acto sexual (92-96).
Estos surfactantes tienen una mayor actividad espermicida (concentraciones de 0.025% inhiben totalmente la mobilidad espermática después de 30 segundos de exposición) que el docusato de sodio y el antiséptico clorhexidina (97,98).
Como detergente catiónico o sapónico y surfactante de la serie amonial, el cloruro de Bensalconio rompe la membrana espermática (99). Además, el gel F-5 (que contiene ácido cólico, cloruro de Bensalconio, y nonoxydol-9) en la esponja contraceptiva "Protectaid" ejerce una actividad inhibitoria dosis-dependiente sobre la transcriptasa inversa asociada con VIH-1 en un sistema acelular, y sobre el potencial de VIH-1 de infestar eficientemente linfocitos humanos (100).
Los estudios conducidos en Italia desde 1983 hasta 1986 (95), en España (96), y en Francia (93) mostraron que el cloruro de Bensalconio en una esponja, supositorio, o tampón (cilindros de polivinil suave) es un contraceptivo que es también útil en la prevención de enfermedades transmitidas sexualmente.
Un estudio en Alemania, conducido entre Marzo de 1986 y Diciembre de 1987, fue inconcluso porque la liberación del espermicida de la esponja no era confiable (99).
Una ventaja del cloruro de Bensalconio sobre el nonoxydol-9, consiste en la falta de absorción del primero a través de la pared vaginal, tal como se ha demostrado en pruebas en mujeres y ratas (97).
En tal sentido, cabe resaltar que la dosis a la cual el cloruro de Bensalconio puede ser embricida y fetocida en la rata es aproximadamente 143 veces superior a la recomendada para controlar la concepción en mujeres (101,102).
En resumen, hemos demostrado en este reporte varias posibles actividades inhibitorias de las ales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) sobre VIH: [1] Las sales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) inhiben la proliferación de células T la cual es requerida para la replicación de VIH en tales células, [2] VIH usa receptores acoplados a proteínas G como cofactores de entrada a las células T CD4+ y a los monocitos, y las sales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) interactúan con proteínas G; [3] el bromuro de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) inhibe la producción de TNF-a, una citoquina que estimula la actividad linfoproliferativa de célula T y la replicación de VIH.
Estas últimas observaciones junto con aquellas mencionadas en la Introducción y en la Discusión (resumidas en la Figura 6 como segmentos del ciclo de vida de VIH potencialmente sensibles a las sales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS)), junto con la actividad espermicida de las sales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS), favorecen su uso en las concentraciones adecuadas como contraceptivos y como armas contra agentes tales como VIH, papilomavirus y herpesvirus, los cuales están involucrados en enfermedades transmitidas sexualmente.
Estudios futuros sobre las aplicaciones terapéuticas de las sales de Bensalconio (K-ODONTO PLUS) requerirán de determinaciones de sus propiedades de absorción, farmacoquinética, y farmacodinámica en sistemas corporales.
PUBLICADA EN LA REVISTA DE LA SOCIEDAD PERUANA DE DERMATOLOGIA CON MOTIVO DE LA ULTIMA CUMBRE DEL SIDA LLEVADA A EFECTO EN NOVIEMBRE DE 1998 EN LA UNIVERSIDAD DE SAN MARCOS
DERMATOLOGIA PERUANA
Volumen 8 – Número 1 Enero Junio
LIMA PERU 1998
BIBLIOGRAFIA
1. Wainberg, M.A., Spira, B., Bleau, G. and Thomas, R. Inactivation of human immunodeficiency virus type 1 in tissue culture fluid and in genital secretions by the spermicide benzalkonium chloride. J. Clin. Microbiol., 1990; 28(1):156-158.
2. Feng, Y., Broder, C.C., Kennedy, P.E., and Berger, E.A. HIV-1 entry cofactor: Functional cDNA cloning of a seven-transmembrane, G protein-coupled receptor. Science, 1996; 272:872-877.
3. Deng, H., Liu, R., Ellmeier, W., Choe, S., Unutmaz, D., Burkhart, M., Marzio, P.D., Marmon, S., Sutton, R.E., Hill, C.M., Davis, C.B., Peiper, S.C., Schall, T.J., Littman, D.R., and Landau, N.R. Identification of a major recpetor for primary isolates of HIV-1. Nature, 1996; 381(6584):661-666.
4. Dragic, T., Litwin, V., Allaway, G.P., Martin, S.R., Huang, Y., Nagashima, K.A., Cayanan, C., Maddon, P.J., Koup, R.A., Moore, J.P., and Paxton, W.A. HIV-1 entry into CD4+ cells is mediated by the chemokine receptor CC-CKR-5. Nature, 1996; 381(6584):667-673.
5. Gallo, C.J., Hand, A.R., Jones, T.L., and Jaffe, L.A. Stimulation of Xenopus oocyte maturation by inhibition of the G-protein alpha S subunit, a component of the plasma membrane and yolk platelet membranes. J. Cell Biol., 1995; 130(2):275-284.
6. Kinane, T.B., Finder, J.D., Kawashima, A., Brown, D., Abbate, M., Fredericks, W.J., Sukhatme, V.P., Rauscher, F.J.III, and Ercolani, L. LLC-PK1 cell growth is repressed by WT1 inhibition of G-protein alpha i-2 protooncogene transcription. J. Biol. Chem., 1995; 270(51):30760-30764.
7. Strader, C.D., T.M. Fong, M.R. Tota, D. Underwood, D., and Dixon, R.A.F. Structure and function of G protein-cpupled receptors. Annu. Rev. Biochem., 1994; 63:101-132.
8. Withrow, T.J., Brown, N.T., Hitchins, V.M., and Strickland, A.G. Cytotoxicity and mutagenicity of ophthalmic solution preservatives and UVA radiation in L5178Y cells. Photochemistry & Photobiology, 1989; 50(3):385-389.
9. Damour, O., Hua, S.Z., Lasne, F., Villain, M., Rousselle, P., and Collombel, C. Cytotoxicity evaluation of antiseptics and antibiotics on cultured human fibroblasts and keratinocytes. Burns, 1992; 18(6):479-485.
10. Cunliffe, I.A., McIntyre, C.A., Rees, R.C., and Rennie, I.G. The effect of topical cholinergic medications on human Tenon's capsule fibroblasts in tissue culture. Graefes Archive for Clin. & Exp. Ophthalmol., 1995; 233(8):507-512.
11. Cunliffe, I.A., McIntyre, C.A., Rees, R.C., and Rennie, I.G. Pilot study on the effect of topical adrenergic medications on human Tenon's capsule fibroblasts in tissue culture. Br. J. Ophthalmol., 1995; 79(1):70-75.
12. Kajino, T.: Effect of benzalkonium chloride on cultured V79 cells. Shigaku - Odontology, 1987; 75(1):63-74.
13. Samples, J.R., Binder, P.S., and Nayak, S. The effect of epinephrine and benzalkonium chloride on cultured corneal endothelial and trabecular meshwork cells. Exp. Eye Res., 1989; 49(1):1-12.
14. Eun, H.C., Chung, J.H., Jung, S.Y., Cho, K.H., and Kim, K.H. A comparative study of the cytotoxicity of skin irritants on cultured human oral and skin keratinocytes. Br. J. Dermatol., 1994; 130(1):24-28.
15. Fabreguette, A., Zhi Hua, S., Lasne, F., and Damour, O. Evaluation of the cytotoxicity of antiseptics used in current practice on cultures of fibroblasts and keratinocytes. Pathologie Biologie, 1994; 42(9):888-892.
16. Muller-Decker, K., Furstenberger, G., and Marks, F. Keratinocyte-derived proinflammatory key mediators and cell viability as in vitro parameters of irritancy: a possible alternative to the Draize skin irritation test. Toxicol. & Applied Pharmacol., 1994; 127(1):99-108.
17. Fletcher, M.A., Baron, G.C., Ashman, M.R., Fischl, M.A., and Klimas, N.G. The use of whole blood methods in assessment of immune parameters in immunodeficiency states. Diagn. Clin. Immunol., 1987; 5:69-81.
18. Fletcher, M.A., Azen, S., Adelberg, B., Gjerset, G., Hassett, J., Kaplan, J., Niland, J., Odom-Maryon, T., Parker, J., Stites, D., Mosely, J., and the Transfusion Safety Study Group. Immunophenotyping in a multicenter study: the transfusion safety experience. Clin. Immunol. Immunopathol., 1989; 52:38-47.
19. Patarca, R., Sandler, D., Walling, J., Klimas, N.G., and Fletcher, M.A. Assessment of immune mediator expression levels in biological fluids and cells: a critical appraisal. Crit. Rev. Oncog., 1995; 6(2):117-149.
20. Patarca, R., Fletcher, M.A., and Podack, E.R. Cytolytic cell functions. In: Manual of Clinical Laboratory Immunology. Rose, N.R., de Macario, E.C., Folds, J.D., Lane, H.C., and Nakamura, R.M. (Eds.) 5th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. (1996).
21. Li, M., Yang, J., Shen, G.X., Zhang, Q., Liu, S.P., Liu, Z.B., and Ye, W.X. Study on lymphocyte activation and proliferation induced by anti-CD3 MoAb. J. Tongji Med. Univ., 1994; 14(4):209-212.
22. Burstein, S., Budrow, J., Debatis, M., Hunter, S.A., and Subramanian, A. Phospholipase participation in cannabinoid-induced release of free arachidonic acid. Biochemical Pharmacol., 1994; 48(6):1253-1264.
23. Kaminski, N.E., Koh, W.S., Yang, K.H., Lee, M., and Kessler, F.K. Suppression of the humoral immune response by cannabinoids is partially mediated through inhibition of adenylate cyclase by a pertussis toxin-sensitive G-protein coupled mechanism. Biochemical Pharmacol., 1994; 48(10):1899-1908.
24. Dubois, P.M., Andris, F., Shapiro, R.A.,Gilliland, L.K., Kaufman, M., Urbain, J., Ledbetter, J.A., and Leo, O. T cell long-term hyporesponsiveness follows antigen receptor engagement and results from defective signal transduction. Eur. J. Immunol., 1994; 24(2):348-354.
25. Stewart, S.J., Cunningham, G.R., and House, F.S. Activation of phospholipase D following perturbation of the human T lymphocyte antigen receptor/CD3 complex is dependent upon protein kinase C. Cellular Signalling, 1993; 5(3):315-323.
26. Ohmura, T., Sakata, A., and Onoue, K. A 68-kD GTP-binding protein associated with the T cell receptor complex. J. Exp. Med., 1992; 176(3):887-891.
27. Shan, X., Luo, H., Houle, B., and Wu, J. Expression of a G-protein beta subunit-related gene during lymphocyte activation. Int. Immunol., 1994; 6(5):739-749.
28. Mattson, E., Van Dijk, H., Van Kessel, K., Verhoef, J., Fleer, A., and Rollof, J. Intracellular pathways involved in tumor necrosis factor-alpha release by human monocytes on stimulation with lipopolysaccharide or staphylococcal peptidoglycan are partly similar. J. Inf. Dis., 1996; 173(1):212-218.
29. Merrill, J.E., Koyanagi, Y., and Chen, I.S.Y. Interleukin-1 and tumor necrosis factor a can be induced from mononuclear phagocytes by human immunodeficiency virus type 1 binding to the CD4 receptor. J. Virol., 1989; 63:4404-4408.
30. Vyakarnam, A., McKeating, J., Meager, A., and Beverly, P.C. Tumour necrosis factors (a, b) induced by HIV-1 in peripheral blood mononuclear cells potentiate virus replication. AIDS, 1990; 4:21-28.
31. Tartaglia, L.A. and Goeddel, D.V. Two TNF receptors. Immunol. Today, 1992; 13:151-153.
32. Fazeli, F., Dezube, B.J., Allen-Ryan, J., Pardee, A.B., and Ruprecht, R.M. Pentoxifylline (Trental) decreases the replication of the human immunodeficiency virus type 1 in human peripheral blood mononuclear cells and in cultured T cells. Blood, 1991; 77(8):1653-1656.
33. Wilmer, J.L., Burleson, F.G., Kayama, F., Kanno, J., and Luster, M.I. Cytokine induction in human epidermal keratinocytes exposed to contact irritants and its relation to chemical-induced inflammation in mouse skin. J. Invest. Dermatol., 1994; 102(6):915-922.
34. Ray, K., Thompson, N., Kennard, N., Rollins, P., Grenfell, S., Witham, S., Smithers, N., and Solari, R. Investigation of guanine-nucleotide-binding protein involvement and regulation of cyclic AMP metabolism in interleukin-1 signal transduction. Biochemical J., 1992; 282(Pt. 1):59-67.
35. Ahuja, S.K., Ozcelik, T., Milatovitch, A., Francke, U., and Murphy, P.M. Molecular evolution of the human interleukin-8 receptor gene cluster. Nature Genetics, 1992; 2(1):31-36.
36. Bacon, K.B., Premack, B.A., Gardner, P., and Schall, T.J. Activation of dual T cell signaling pathways by the chemokine RANTES. Science, 1995; 269(5231):1727-1730.
37. Bischoff, S.C., Krieger, M., Brunner, T., Rot, A., von Tscharner, V., Baggiolini, M., and Dahinden, C.A. RANTES and related chemokines activate human basophil granulocytes through different G protein-coupled receptors. Eur. J. Immunol., 1993; 23(3):761-767.
38. Fan, Y. and McCloskey, M.A. Dual pathways for GTP-dependent regulation of chemoattractant-activated K+ conductance in murine J774 monocytes. J. Biol. Chem., 1994; 269(50):31533-31543.
39. Kemeny, L., Ruzicka, T., Dobozy, A., and Michel, G. Role of interleukin-8 receptor in skin. Int. Arch. Allergy & Immunol., 1994; 104(4):317-322.
40. Mukaida, N. A newly discovered chemotactic factor for neutrophil: interleukin-8. Rinsho Byori - Jap. J. Clin. Pathol., 1992; 40(4):371-379.
41. Rot, A., Krieger, M., Brunner, T., Bischoff, S.C., Schall, T.J., and Dahinden, C.A. RANTES and macrophage inflammatory protein 1 alpha induce the migration and activation of normal human eosinophil granulocytes. J. Exp. Med., 1992; 176(6):1489-1495.
42. Thelen, M., Uguccioni, M., and Bosiger, J. PI 3-kinase-dependent and independent chemotaxis of human neutrophil leukocytes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1995; 217(3):1255-1262.
43. Wu, D., LaRosa, G.J., and Simon, M.I. G protein-coupled signal transduction pathways for interleukin-8. Science, 1993; 261(5117):101-103.
44. Van Deventer, S.J.H., Hart, M., Van der Poll, T., Hack, C.E., and Aarden, L.A. Endotoxin and tumor necrosis factor-a-induced interleukin-8 release in humans. J. Inf. Dis., 1993; 167:461-464.
45. Hakansson, B., Forsgren, A., Tegner, H., and Toremalm, N.G. Inhibitory effects of nasal drops components on granulocyte chemotaxis. Pharmacol. & Toxicol., 1989; 64(4):321-323.
46. Bjerknes, R. and Steinsvag, S.K. Inhibition of human neutrophil actin polymerization, phagocytosis and oxidative burst by components of decongestive nosedrops. Pharmacol. & Toxicol., 1993; 73(1):41-45.
47. Wenzel, H.R., Feldmann, A., Engelbrecht, S., and Tschesche, H. Activation of the human leukocyte proteinases elastase and cathepsin G by various surfactants. Biol. Chem. Hoppe-Seyler, 1990; 371(8):721-724.
48. Kawa, J.E., Higginbotham, E.J., Chang, I.L., and Yue, B.Y. Effects of antiglaucoma medications on bovine trabecular meshwork cells in vitro. Exp. Eye Research, 1993; 57(5):557-565.
49. Fajardo, L.F., Kwan, H.H., Kowalski, J., Prionas, S.D., and Wilson, A.C. Dual role of tumor necrosis factor-a in angiogenesis. Am. J. Pathol., 1992; 140:539-544.
50. Koch, A.E., Polverini, P.J., Kunkel, S.L., Harlow, L.A., DiPrieto, L.A., Elner, V.M., Elner, S.G. and R.M. Striter, R.M. Interleukin-8 as a macrophage-derived mediator of angiogenesis. Science, 1992; 258:1798-1801.
51. Leibovich, S.J., Polverini, P.J., Sheperd, H.M., Wiseman, D.M., Shively, V., and Nuseir, N. Macrophage-induced angiogenesis is mediated by tumor necrosis factor-alpha. Nature, 1987; 329:630-632.
52. Abrams, J. and Farhood, A.I. Infection-associated vascular lesions in acquired immunodeficiency syndrome patients. Human Pathol.,1989; 20(10):1025-1026.
53. Cáceres-Ríos, H., Rodríguez-Tafur, J., Bravo-Puccio, F., Maguiña-Vargas, C., Carrillo-Ramos, D., and Patarca, R. Verruga peruana: An infectious endemic angiomatosis. Crit. Rev. Oncog., 1995; 6(1):47-56.
54. Cockerell, C.J., Whitlow, M.A., Webster, G.F., and Friedman-Kien, A.E. Epithelioid angiomatosis: a distinct vascular disorder in patients with AIDS or AIDS-related complex. Lancet, 1987; 2:654-656.
55. Cockerell, C.J. and LeBoit, P.E. Bacillary angiomatosis: a newly characterized, pseudoneoplastic, infectious, cutaneous vascular disorder. J. Am. Acad. Dermatol., 1990; 22:501-512.
56. Cockerell, C., Tierno, P., Friedman-Kien, A., and Kim, K.S. Clinical, histologic, microbiologic, and biochemical characterization of causative agent of bacillary (epithelioid) angiomatosis: a rickettsial illness with features of bartonellosis. J. Invest. Dermatol., 1991; 97:812-817.
57. Dealler, S. Cat scratch disease, bartonellosis, and Kaposi sarcoma. Lancet, 1988; 2(8625):1422-1423.
58. Goldman, L. Bartonellosis and Kaposi sarcoma of AIDS. Lancet, 1989; 1(8462):852.
59. LeBoit, P., Egoert, B.M., Stoler, M.H., Strauchen, J.A., Berger, T.G., Benedict Yen, T.S., Bonfiglio, T.A., English, C.K., and Wear, D.J. Epithelioid-hemangioma-like vascular proliferation in AIDS: manifestation of cat scratch disease bacillus infection? Lancet, 1988; 1:960-963.
60. Relman, D.A., Lepp, P.W., Sadler, K.N. and Schmidt, T.M. Phylogenetic relationships among the agent of bacillary angiomatosis, Bartonella bacilliformis, and other alpha-proteobacteria. Mol. Microbiol., 1992; 6(13):650-657.
61. Stoler, M.H., Bonfiglio, T.A., Steigbigel, R.T., and Pereira, M. An atypical subcutaneous infection associated with AIDS. Am. J. Clin. Pathol., 1983; 80:714-718.
62. Wernert, N., Raes, M.B., Lasalle, P., Dehouck, M.P., Gosselin, B., Vandenbunder, B., and Stehelin, D. c-ets 1 proto-oncogene is a transcription factor expressed in endothelial cells during tumor vascularization and other forms of angiogenesis in humans. Am. J. Pathol., 1992; 140(1):119-127.
63. Pandey, A., Shao, H., Marks, R.M., Polverini, P.J., and Dixit, V.M. Role of B61, the ligand for the Eck receptor tyrosine kinase, in TNF-a-induced angiogenesis. Science, 1995; 268:567-569.
64. Camussi, G., Montrucchio, G., Lupia, E., De Martino, A., Perona, L., Arese, M., Vercellone, A., Toniolo, A., and Bussolino, F. Platelet-activating factor directly stimulates in vitro migration of endothelial cells and promotes in vivo angiogenesis by a heparin-dependent mechanism. J. Immunol., 1995; 154:6492-6501.
65. Montrucchio, G., Lupia, E., Battaglia, E., Passerini, G., Bussolino, F., Emanuelli, G., and Camussi, G. Tumor necrosis factor-a-induced angiogenesis depends on in situ platelet-activating factor biosynthesis. J. Exp. Med., 1994; 180:377-382.
66. Brom, J. and Konig, W. Cytokine-induced (interleukin-3, -6, and -8 and tumour necrosis factor-beta) activation and deactivation of human neutrophils. Immunology, 1992; 75(2):281-285.
67. Akinsanya, A.A. and Whetton, A.D. IL-3 stimulated haemopoietic stem cell proliferation: evidence for G protein independent mitogenic signalling events. J. Cell. Physiol., 1992; 152(2):245-252.
68. Nishigaki, N., Negishi, M., Sugimoto, Y., Namba, T., Narumiya, S., and Ichikawa, A. Characterization of the prostaglandin E receptor expressed on a cultured mast cell line, Bnu-2c13. Biochemical Pharmacol., 1993; 46(5):863-869.
69. Vassiliadis, S. and Papamatheakis, J. The p21ras protein as an intermediate signaling molecule in the IL-4-induced HLA-DR expression on normal and leukemic human myeloid cells. Cellular Immunol., 1992; 142(2):426-433.
70. Clutterbuck, E.J. and Sanderson, C.J. Human eosinophil hematopoiesis studied in vitro by means of murine eosinophil differentiation factor (IL-5): production of functionally active eosinophils from normal human bone marrow. Blood, 1988; 71:646-651.
71. Coeffier, E., Joseph, D., and Vargaftig, B.B. Activation of guinea pig eosinophils by human recombinant IL-5. Selective priming to platelet-activating factor-acether and interference of its antagonists. J. Immunol., 1992; 147:2595-2602.
72. Collins, P.D., Marleau, S., Griffiths-Johnson, D.A., Jose, P.J., and Williams, T.J. Cooperation between interleukin-5 and the chemokine eotaxin to induce eosinophil accumulation in vivo. J. Exp. Med., 1995; 182:1169-1174.
73. Sanderson, C.J., Warren, D.G., and Strath, M. Identification of a lymphokine that stimulates eosinophil differentiation in vitro. Its relationship to interleukin 3, and functional properties of eosinophils produced in cultures. J. Exp. Med., 1985; 162:60-74.
74. Sehmi, R., Wardlaw, A.J., Cromwell, O., Kurihara, K., Waltmann, P., and Kay, A.B. Interleukin-5 selectively enhances the chemotactic response of eosinophils obtained from normal but not eosinophilic subjects. Blood, 1992; 79:2952-2959.
75. Tai, P.C., Sun, L., and Spry, C.J.F. Effects of IL-5, granulocyte/macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and IL-3 on the survival of human blood eosinophils in vitro. Clin. Exp. Immunol., 1991; 85:312-316.
76. Warringa, R.A.J., Mengelers, H.J.J., Kuijper, P.H.M., Raaijmakers, J.A.M., Bruijnzeel, P.L.B., and Koenderman, L. In vivo priming of platelet-activating factor-induced eosinophil chemotaxis in allergic asthmatic individuals. Blood, 1992; 79:1836-1841.
77. Yamaguchi, Y., Suda, T., Suda, J., Eguchi, M., Miura, Y., Harada, N., Tominaga, A., and Takatsu, K. Purified interleukin 5 supports the terminal differentiation and proliferation of murine eosinophilic precursors. J. Exp. Med., 1988; 167:43-56.
78. Lim, K.G., Wan, H.-C., Bozza, P.T., Resnick, M.B., Wong, D.T.W., Cruikshank, W.W., Kornfeld, H., Center, D.M. and Weller, P.F. Human eosinophils elaborate the lymphocyte chemoattractants IL-16 (lymphocyte chemoattractant factor) and RANTES. J. Immunol., 1996; 156:2566-2570.
79. Mittrucker, H.W. and Fleischer, B. Functional localization of an exocytosis-triggering G-protein in human cytotoxic T lymphocytes. Immunology, 1992; 76(4):610-615.
80. Bonnema, J.D., Rivlin, K.A., Ting, A.T., Schoon, R.A., Abraham, R.T., and Leibson, P.J. Cytokine-enhanced NK cell-mediated cytotoxicity. Positive modulatory effects of IL-2 and IL-12 on stimulus-dependent granule exocytosis. J. Immunol., 1994; 152(5):2098-2104.
81. Maghazachi, A.A. and Al-Aoukaty, A. Gs is the major G protein involved in interleukin-2-activated natural killer (IANK) cell-mediated cytotoxicity. Successful introduction of anti-G protein antibodies inside streptolysin O-permeabilized IANK cells. J. Biol. Chem., 1994; 269(9):6796-6802.
82. Willis, C.M., Stephens, C.J., and Wilkinson, J.D. Differential effects of structurally unrelated chemical irritants on the density and morphology of epidermal CD1+ cells. J. Investigative Dermatol., 1990; 95(6):711-716.
83. Beckman, E.M., Porcell, S.A., Morita, C.T., Behar, S.M., Furlong, S.T., and Brenner, M.B. Recognition of a lipid antigen by CD1-restricted ab+ T cells. Nature, 1994; 372:691-694.
84. Bendelac, A., Olivier, L., Quimby, M.E., Yewdell, J.W., Bennink, R., and Brutkiewicz, R.R. CD1 recognition by mouse NK1+ T lymphocytes. Science, 1995; 268:863-865.
85. Constant, P., Davodeau, F., Peyrat, M.-A., Poquet, Y., Puzo, G., Bonneville, M., and Fournié, J.-J. Stimulation of human gd T cells by nonpeptidic mycobacterial ligands. Science, 1995; 264:267-270.
86. Sieling, P.A., Chatterjee, D., Porcelli, S.A., Prigozy, T.I., Mazzaccaro, R.J., Soriano, T., Bloom, B.R.,Brenner, M.B., Kronenberg, M., Brennan, P.J., and Modlin, R.L. CD1-restricted T cell recognition of microbial lipoglycan antigens. Science, 1995; 269:227-230.
87. Lampe, M., Patarca, R., Iregui, M.V., and Cantor, H.I. Polyclonal B cell activation by Eta-1 and autoimmunity. J. Immunol., 1991; 147:2902-2906.
88. Patarca, R., Freeman, G.J., Singh, R.P., Wei, F.-Y., Durfee, T., Blattner, F., Regnier, D.C., Kozak, C.A., Mock, B.A., Morse, H.C.III., Jerrells, T.R., and Cantor, H. Structural and functional studies of the Early T Lymphocyte Activation 1 (Eta-1) gene. Definition of a novel T cell-dependent response associated with genetic resistance to bacterial infection. J. Exp. Med., 1989; 170:145-161.
89. Patarca, R., Wei, F.-Y., Singh, P., Morasso, M.I., and Cantor, H. Dysregulated expression of the T-cell cytokine Eta-1 in CD4-8- lymphocytes during the development of murine autoimmune disease. J. Exp. Med., 1990; 172:1177-1183.
90. Patarca, R., Saavedra, R.A., and Cantor, H. Molecular and cellular basis of genetic resistance to bacterial infection: The role of the Early T-lymphocyte activation-1/osteopontin gene. Crit. Rev. Immunol., 1993; 13(3/4):225-246.
91. Singh, R.P., Patarca, R., Schwartz, J., Singh, P., and Cantor, H. Definition of a specific interaction between early-T-lymphocyte-activation-1 (eta-1) protein and murine macrophages in vitro and in vivo. J. Exp. Med., 1990; 171:1931-1942.
92. Erny, R. and Siboni, C. Benzalkonium chloride tampons. Local tolerance and effects on cervix mucus. Journal de Gynecologie, Obstetrique et Biologie de la Reproduction, 1983; 12(7):767-774.
93. Erny, R. and Siborni, C. The effect of benzalkonium chloride on ovulatory cervical mucus. Acta Europaea Fertilitatis, 1987; 18(2):109-111.
94. Frateschi, M., Zandonini, G.F., and Mazzoleni, G.C. Benzalkonium in local contraception and sexually-transmitted diseases. Annali di Ostetricia, Ginecologia, Medicina Perinatale, 1990; 111(4):265-269.
95. Mendez, F., Castro, A., and Ortega, A. Use effectiveness of a spermicidal suppository containing benzalkonium chloride. Contraception, 1986; 34(4):353-362.
96. Zufferey, M.M. Real and false risks of local contraception: spermicides and the diaphragm. Journal de Gynecologie, Obstetrique et Biologie de la Reproduction, 1985; 14(3):359-363.
97. Chantler, E., Fisher, H., Solanki, S., and Elstein, M. Quantification of the in vitro activity of some compounds with spermicidal activity. Contraception, 1992; 46(6):527-536.
98. Courtot, A.M., Nikas, G., Gravanis, A., and Psychoyos, A. Effects of cholic acid and 'Protectaid' formulations on human sperm motility and ultrastructure. Human Reproduction, 1994; 9(11):1999-2005.
99. Meyer, U., Gerhard, I., and Runnebaum, B. Benzalkonium chloride for vaginal contraception - the vaginal sponge. Geburtshilfe und Frauenheilkunde, 1990; 50(7):542-547.
100. Psychoyos, A., Creatsas, G., Hassan, E., Georgoulias, V., and Gravanis, A. Spermicidal and antiviral properties of a new vaginal sponge (Protectaid) containing sodium cholate. Human Reproduction, 1993; 8(6):866-869.
101. Buttar, H.S. Embryotoxicity of benzalkonium chloride in vaginally treated rats. J. Applied Toxicol., 1985; 5(6):398-401.
102. Momma, J., Takada, K., Aida, Y., Takagi, A., Yoshimoto, H., Suzuki, Y., Nakaji, Y., Kurokawa, Y., and Tobe, M. Effects of benzalkonium chloride on pregnant mice. Eisei Shikenjo Hokoku - Bulletin of National Institute if Hygienic Sciences, 1987; 105:20-25.
LEYENDAS DE LAS FIGURAS
Figura 1
El bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) muestra actividad inhibitoria sobre las actividades proliferativas de células monucleares de sangre periférica (PBMC) en respuesta a los mitógenos fitohemaglutinina (PHA) y al de la fitolaca (PWM). Los resultados en las gráficas están expresados como porcentajes de incorporación de timidina tritiada en presencia relativa a ausencia de distintas concentraciones de bromuro de benzalconio (K-ODONTO PLUS) (promedio + una desviación estandar de tres determinaciones experimentales). Los coeficientes de correlación para ambas gráficas están indicados en las esquinas superiores derechas.
Figura 2
El bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) no afecta las proporciones de las poblaciones de linfocitos en los ensayos de sangre completa en condiciones de ausencia (medio de cultivo solo, GM) ó presencia de estimulación (fitohemaglutinina, PHA; mitógeno de fitolaca, PWM).
Figura 3
El bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) no afecta las proporciones de poblaciones de linfocitos después de una hora de exposición de sangre periférica.
Figura 4
El bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) tiene actividad diferencial sobre la expresión de genes de citoquinas en células mononucleares de sangre periférica estimuladas con fitohemaglutinina (PHA) o mitógeno de fitolaca (PWM).
Figura 5
El bromuro de laurildimetilbenzilamonio (K-ODONTO PLUS) no afecta la actividad citotóxica de células asesinas naturales en concentraciones de hasta 0.025%. El efecto visto a concentraciones mayores se debe a lisis celular secundaria a la actividad detergente de la sal de benzalconio (K-ODONTO PLUS).
Figura 6
Sitios potencialmente sensibles a las sales de benzalconio (K-ODONTO PLUS) en el ciclo de vida del virus de inmunodeficiencia humana.
Exitodental.com.ve vela por la ética y seriedad del contenido de sus publicaciones, sin embargo no se hace responsable de cualquier consecuencia, directa o indirecta, que de su lectura o aplicación se derive.